恐懼和恐懼記憶的消除對于生物體在不斷變化的環(huán)境中生存至關(guān)重要，這些記憶被認(rèn)為是由大腦中單獨(dú)的神經(jīng)元群編碼的，但目前它們在大腦中的位置仍然難以確定。

島葉皮層（IC）對于處理厭惡和感知刺激以及協(xié)調(diào)適當(dāng)?shù)男袨榉磻?yīng)至關(guān)重要，被認(rèn)為是恐懼和恐懼記憶消退的關(guān)鍵腦區(qū)。最近的一項(xiàng)研究表明，IC作為恐懼的關(guān)鍵狀態(tài)依賴調(diào)節(jié)因子，調(diào)控了恐懼和恐懼記憶消退之間的平衡。然而，特定IC投射神經(jīng)元是否存在以及如何參與恐懼和恐懼記憶仍然未知。

在此背景下， 2022年9月21日，上海交通大學(xué)徐天樂、張思宇與復(fù)旦大學(xué)李偉廣課題組在Nature Communications發(fā)文揭示了島葉皮層中負(fù)責(zé)恐懼記憶存儲(chǔ)和恐懼記憶消退的兩種神經(jīng)元及其相互作用機(jī)制。

首先，課題組將小鼠分為僅聲音刺激組(conditioned stimulus, CS)和同時(shí)進(jìn)行聲音刺激和足部電擊組（CS+US-unconditioned stimulus），并以mCherry+和c-fos+信號分別捕捉IC腦區(qū)恐懼和恐懼消退激活的神經(jīng)元。行為學(xué)結(jié)果顯示：CS+US組小鼠聽到警報(bào)聲后的僵直時(shí)間顯著增加；免疫染色結(jié)果顯示其mCherry+和c-fos+信號顯著增加。隨后，課題組CS+US組小鼠進(jìn)行額外一天的恐懼恢復(fù)訓(xùn)練，發(fā)現(xiàn)其c-fos+信號顯著減少。進(jìn)一步的免疫染色結(jié)果顯示：恐懼記憶神經(jīng)元投射至中央杏仁核（CeA），而記憶消退神經(jīng)元?jiǎng)t主要投射至伏隔核（NAc）。

圖1|恐懼記憶和記憶消退神經(jīng)元的不同投射

為了進(jìn)一步探究上述兩種環(huán)路的功能，課題組監(jiān)測了小鼠在訓(xùn)練期間腦部的鈣活動(dòng)情況，并發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)IC-CeA投射神經(jīng)元在被足部點(diǎn)擊時(shí)鈣信號顯著上調(diào)，表明其參與存儲(chǔ)和表達(dá)恐懼記憶；而IC-NAc投射神經(jīng)元在恐懼記憶消退訓(xùn)練中鈣信號水平顯著升高，表明其存儲(chǔ)和表達(dá)消退記憶。此外，化學(xué)抑制CeA和NAc投射神經(jīng)元分別造成小鼠僵直時(shí)間的減少和增加；而光激活CeA和NAc投射神經(jīng)元?jiǎng)t結(jié)果相反。

圖2|光遺傳激活CeA和NAc投射神經(jīng)元對小鼠僵直時(shí)間影響不同

為了充分了解恐懼和恐懼記憶消退如何特異性地在IC中產(chǎn)生不同的投射，課題組研究了IC CeA和NAc投射神經(jīng)元的內(nèi)在電生理特性，以及它們潛在的相互作用。課題組選用IC投射神經(jīng)元含量最高的第5層腦區(qū)。電生理結(jié)果顯示：IC-CeA神經(jīng)元比IC-NAc神經(jīng)元具有更低閾電位和更高的內(nèi)在興奮性，即IC-CeA神經(jīng)元興奮性更高。此外，光遺傳激活IC-CeA神經(jīng)元誘導(dǎo)了IC-NAc神經(jīng)元的興奮性和抑制性突觸后電流（oEPSC和oIPSC），同時(shí)光遺傳激活IC-CeA神經(jīng)元使得恐懼訓(xùn)練期間IC-NAc神經(jīng)元PPR和IPSC-EPSC 比值增加。同樣，光激活IC-NAc神經(jīng)元也將誘導(dǎo)IC-CeA神經(jīng)元在恐懼訓(xùn)練期間PPR和IPSC-EPSC 比值增加。這些結(jié)果表明IC-CeA和IC-NAc投射神經(jīng)元之間還存在記憶行為依賴的交互抑制，維持局部環(huán)路中的興奮-抑制平衡。

圖3|光激活IC-CeA神經(jīng)元使得恐懼訓(xùn)練期間IC-NAc神經(jīng)元PPR和IPSC-EPSC 比值增加

最后，課題組以逆向跨單突觸示蹤技術(shù)在全腦范圍內(nèi)追蹤了兩群IC投射神經(jīng)元集群的上一級神經(jīng)元，并通過光遺傳技術(shù)發(fā)現(xiàn)負(fù)責(zé)高級認(rèn)知功能的額葉皮層如眶額皮層（OFC）向負(fù)責(zé)恐懼記憶消退的IC-NAc神經(jīng)元的突觸傳入更強(qiáng)，光激活OFC→IC神經(jīng)投射或OFC→IC→NAc神經(jīng)環(huán)路可促進(jìn)消退恐懼記憶，減少小鼠在訓(xùn)練期間的僵直時(shí)間。該研究表明，OFC對IC特定記憶神經(jīng)元進(jìn)行自上而下的偏向性控制，從而選擇性地驅(qū)動(dòng)特定記憶的表達(dá)。

圖4|光激活OFC→IC→NAc神經(jīng)環(huán)路減少了小鼠在訓(xùn)練期間的僵直時(shí)間

總的來說，本文通過對小鼠進(jìn)行恐懼和恐懼消退訓(xùn)練發(fā)現(xiàn)兩個(gè)不同的投射神經(jīng)元亞群在島葉皮質(zhì)（IC）內(nèi)的定位——中央杏仁核（CeA）和伏隔核（NAc），并發(fā)現(xiàn)兩者分別編碼恐懼和恐懼記憶消退，且兩者具有互助性，并通過逆行示蹤發(fā)現(xiàn)IC-NAc投射神經(jīng)元優(yōu)先受到來自眶額葉皮層（OFC）的皮層間輸入的支配以調(diào)控恐懼記憶的消退。